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RNA數字表達譜高通量測序

利用高通量測序技術測定樣本中每個轉錄本3’端一段特定的標簽序列來定量相應轉錄本的表達水平以及比較樣本之間基因表達差異。因采用通用接頭,可以樣本快速進行測序,

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利用高通量測序技術測定樣本中每個轉錄本3’端一段特定的標簽序列來定量相應轉錄本的表達水平以及比較樣本之間基因表達差異。因采用通用接頭,可以樣本快速進行測序,檢測某一物種特定狀態下的基因表達情況。構建數字基因表達譜(Digital Gene Expression Profile)。利用新一代高通量測序技術和高性能的計算分析技術,能夠全面地檢測某一物種特定組織在特定狀態下的基因表達情況,可以應用于腫瘤基因藥物篩選,分子育種、藥物研發及基礎研究等領域。

數字基因表達譜測序服務流程:

1.樣品RNA準備
2.測序文庫構建

(1)使用oligo dT微珠純化mRNA
(2)cDNA反轉錄反應合成合成第一鏈鏈cDNA
(3)合成第二鏈DNA
(4)用限制性內切酶DpnII或NlaII消化cDNAI.
(5)連接特定接頭至5’端
(4)使用標簽酶MmeI消化獲得21bp標簽序列
(5)連接特定接頭至3’端
(6)高保真聚合酶富集構建成功的測序文庫
(7)高通量測序
(8) 數據分析


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