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CRISPR 體外轉錄RNA 化學合成RNA及Cas9蛋白



服務項目 完成周期 收費標準 備注
crRNA 7個工作日 350元/OD 建議合成3條
tracrRNA 7個工作日 450元/OD crRNA/tracrRNA用量為1:2
gRNA 15個工作日 詢價  
Cas9蛋白/Cpf1蛋白 7個工作日 500元/50ug 含核定位信號
gRNA Cas9體外轉錄RNA 7個工作日 2500元 可用于轉染顯微注射等


提供體外轉錄gRNA(50ug)及Cas9 mRNA(10ug,含 NLS及Flag編碼序列),也可提供其他基因體外轉錄服務,加Cap G產物提供10ug,不加Cap G產物提供50ug。

以下是體外轉錄載體和體外轉錄Cas9 mRNA瓊脂糖膠圖及體外轉錄gRNA聚丙烯酰胺膠圖。











體外轉錄Cas9 mRNA及gRNA已經成功用于小鼠原核注射,并得到基因敲除小鼠,總體突變率在50%以上。

化學合成gRNA/crRNA+tracrRNA相比體外轉錄RNA來說具有純度更高,不同修飾可提高RNA的穩定性和特異性;相比質粒或病毒具有不引入DNA,可有效提高特異性,防止非靶基因隨機突變的情況。

化學合成gRNA/crRNA+tracrRNA常與Cas9蛋白一起使用,可在體外識別切割含靶點DNA雙鏈,或用于細胞和各物種基因編輯。



化學合成crRNA和Cpf1蛋白可做為人造限制性內切酶,可在靶序列3端切割產生5端突出5粘性末端DNA,可在無限制性內切酶DNA位點進行切割。

訂購須知:

體外轉錄非編碼產品pri-miRNA;pre-miRNA ;lncRNA; gRNA ;特殊修飾 假尿嘧啶 1甲假尿嘧啶 5甲胞嘧啶 生物素化修飾RNA等)

1. 基因合成費用1.5*基因長度,低于1000元的按照1000計算;

2. 轉錄非編碼費用1500/30ug;序列超過3kb,或特殊序列高GC重復序列等特殊詢價周期

3. 利用T7SP6進行體外轉錄:a. 構建序列正確,通過測序證明構建序列符合客戶指定序列。保證客戶目的RNA產物配套本公司轉染試劑轉染293TqPCR檢測某一個時間點上調呈現顯著差異即可證明產品合格。b. 通過核酸電泳及核酸定量儀,判斷核酸完整性及量符合出貨要求(純度大于80%,產量不超過指定規格正負偏差10%)。C. 生產出貨時限不超過5個工作日,如與特殊情況需要到期前及時溝通協調,因不可預知和不可避免因素不計入期限違約。

 

體外轉錄編碼產品mRNA;對照EGFP mRNAmCherry mRNALnc mRNA

1. 基因合成費用1.5*基因長度+1000

2. 轉錄非編碼費用2500/20~30ug;序列超過3kb,或特殊序列高GC重復序列等特殊詢價周期

3. 利用T7SP6進行體外轉錄:a. 構建序列正確,通過測序證明構建序列符合客戶指定序列。b. 通過核酸電泳及核酸定量儀,判斷核酸完整性及量符合出貨要求(純度大于80%,產量不超過指定規格正負偏差10%)。C. 生產出貨時限不超過5個工作日,如與特殊情況需要到期前及時溝通協調,因不可預知和不可避免因素不計入期限違約。d. 保證陽性轉錄產物配套本公司轉染試劑轉染293T某一個時間點呈現陽性結果。保證客戶目的RNA產物配套本公司轉染試劑轉染293TqPCR檢測某一個時間點上調呈現顯著差異,不保證客戶目的RNA任何細胞其WB或其他功能鑒定結果。

 

如果經過公司293T驗證有上調表達顯著差異(qPCR),并提供PDF版本驗證結果(驗證結果產權不屬與客戶),客戶如需驗證結果完整服務報告,需要另行支付驗證費用3000元,并支付前期貨款,收到貨款后提交全部原始結果。如果驗證無效,可以免費重新轉錄一次或退票退款或做預付款。如果再次無效則不再免費重新轉錄,已經付款做預付款處理。

 

非套餐基因編輯合成RNAcrRNA+transRNA):非套餐類型,客戶提供序列

保證序列合成正確,如需質譜鑒定圖譜,需要另行加收質譜鑒定費用100/條序列,不保證編輯效應,無效不予退款。

 

套餐基因編輯合成RNAcrRNA+transRNA):套餐(一個基因3個或3對雙gRAN靶點)

針對人源的三條單gRNA或雙gRNA保證至少有一條在常規細胞如293細胞中有編輯效應(T7核酸內切酶,PCR或測序有一種方法證實即可),如果客戶反饋無效①需要提供如下材料(293T轉染效率,檢測具體方法步驟)經公司技術確認可以免費重新構建一次或退票,如已經付款可以做成預付款抵扣公司其他產品或服務;②如果重新設計3對再次無效則不再免費重新設計,再次設計需要款到發貨;③如果客戶細胞轉染不進去導致無效或者非人源物種,則不再投訴受理范圍;④Cas9gRNA均為本公司配套產品,非本公司配套產品不做單獨效果保證。

基因編輯Cas9蛋白

保證陽性gRNAcrRNA+transRNA+Cas9蛋白體外切割有效(T7核酸內切酶,PCR或測序有一種方法證實即可);不保證細胞水平和體內水平編輯效應。陽性gRNAcrRNA+transRNA)需要另行購置。

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