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吉瑪產品

shRNA質粒載體

shRNA表達載體帶有抗生素標記,可以在細胞中持續抑制靶基因的表達,持續數星期甚至更久。對于一個已知有效的siRNA序列(例如,經過siRNA合成方法篩選獲得的),需要維持較長時間的基因沉默時,推薦使用shRNA載體系統。

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shRNA表達載體帶有抗生素標記,可以在細胞中持續抑制靶基因的表達,持續數星期甚至更久。對于一個已知有效的siRNA序列(例如,經過siRNA合成方法篩選獲得的),需要維持較長時間的基因沉默時,推薦使用shRNA載體系統。吉瑪致力于提供最先進和最方便的shRNA相關工具,最近推出新一代shRNA表達質粒,一種高效即用型載體,該載體在細胞內可以持續產生shRNAs,從而達到持久抑制目標基因表達的目的。


吉瑪 supersilencingTM shRNA表達載體系統

shRNA表達載體系統特點:

產生短發夾型RNA(shRNA)來完成RNA干擾

方法簡單、經濟實惠,只需合成DNA寡核苷酸

克隆載體使用方便,帶有篩選標記

shRNA質粒穩定,易于操作




GenePharma supersilencingTM shRNA表達載體特點:

1、克隆載體具有兩種形式的克隆酶切位點BbsⅠ?BamHⅠ

BbsⅠ是特殊的限制性內切酶,產生非對稱互補粘性末端,保證插入片斷的方向正確,防止載體自體連接。

2、shRNA多種篩選標記可幫助建立穩定轉染細胞系?

Neo :Neomycin耐受基因?

Hygro :Hygromycin B 耐受基因?

GFP:GFP報告基因?

報告基因GFP可以幫助評價轉染效率和指示RNAi發生位點



本公司共可構建10種RNAi Vector,分別為pGPU6, pGPH1, pGPU6/Neo, pGPH1/Neo, pGPU6/Hygro, pGPH1/Hygro, pGPU6/GFP/Neo, pGPH1/GFP/Neo,pGPU6/RFP/Neo, pGPH1/RFP/Neo。其中pGPU6, pGPH1為無篩選標記RNAi載體;pGPU6/Neo, pGPH1/Neo, pGPU6/Hygro, pGPH1/Hygro為含抗性篩選標記Neomycin和Hygromycin的RNAi載體;pGPU6/GFP/Neo, pGPH1/GFP/Neo分別為含抗性篩選標記Neomycin同時可以表達GFP蛋白的RNAi載體;pGPU6/RFP/Neo, pGPH1/RFP/Neo分別為含抗性篩選標記Neomycin同時可以表達RFP蛋白的RNAi載體

10種RNAi Vector GPU6, pGPH1, pGPU6/Neo, pGPH1/Neo, pGPU6/Hygro, pGPH1/Hygro, pGPU6/GFP/Neo, pGPH1/GFP/Neo,pGPU6/RFP/Neo, pGPH1/RFP/Neo載體圖譜














每套載體均包括線狀或環狀shRNA表達載體,并為您提供整體的解決方案。

質粒表達載體套裝

針對目的基因設計并制備4個shRNA載體,確保4個shRNA中,至少一個,在mRNA水平的基因的抑制效率在70%以上.



套裝組成 數量
針對目的基因的shRNA載體 4個
陽性對照shRNA載體 1個
陰性對照shRNA載體 1個
注:套裝中所有質粒提供量為50ug

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目錄號 產品名稱 規格 價格 交貨期限
C01001 SuperSilencing? shRNA質粒表達載體套裝> 1?套 ¥2,600 2周

?

目錄號 產品名稱 規格 價格 交貨期限
C03001 GAPDH SuperSilevcing shRNA??質粒表達載體 50ug ¥199 1周
C03002 Negative Control SuperSilevcing shRNA??質粒表達載體 50ug ¥199 1周

?我們可以幫您將編碼目標shRNA 的DNA插入質粒,并做序列正確性檢測,您只需告訴我們靶基因序列或Gene ID號和希望插入載體的名稱,我們來幫您構建。我們為您提供足夠使用的純化的編碼您的目的shRNA的表達質粒。

目錄號 產品名稱 規格 價格 交貨期限
C02001 ShRNA質粒表達載體?(pGPU6) 50μg ¥599 2周
C02002 ShRNA質粒表達載體?(pGPH1) 50μg ¥599 2周
C02003 ShRNA質粒表達載體?(pGPU6/Neo) 50μg ¥599 2周
C02004 ShRNA質粒表達載體?(pGPH1/Neo) 50μg ¥599 2周
C02005 ShRNA質粒表達載體?(pGPU6/Hygro) 50μg ¥599 2周
C02006 ShRNA質粒表達載體?(pGPH1/Hygro) 50μg ¥599 2周
C02007 ShRNA質粒表達載體?(pGPU6/GFP/Neo) 50μg ¥599 2周
C02008 ShRNA質粒表達載體?(pGPH1/GFP/Neo) 50μg ¥599 2周
C02009 ShRNA質粒表達載體?(pGPU6/RFP/Neo) 50μg ¥599 2周
C02010 ShRNA質粒表達載體?(pGPH1/RFP/Neo ) 50μg ¥599 2周


如果您選擇吉瑪公司的Validated SuperSilencing shRNATM 質粒表達載體,吉瑪提供配套的陰性對照質粒,陰性對照質粒是RNA干擾試驗所必須的,?
一個好的GAPDH陽性對照載體,可以讓您試驗體系更加穩定,也可以檢測試驗中可能出現的問題。

客戶將siRNA片段克隆到目的表達載體后,需制備大量高純度或無內毒素的質粒進行下一步實驗,為此吉瑪公司推出制備高純度質粒的服務。






服務要求:

1. 客戶提供待制備的質粒(>20ng);

2. 質粒的抗性和酶切圖譜。

3. 目前接受批量訂單(>20),小量制備請來電咨詢。

4. 如果需要詳細的載體構建技術服務報告(包含shRNA序列設計合成、載體的構建、酶切圖譜等),每份需要200元。



操作流程:

1. 質粒轉化大腸桿菌感受態細胞并鑒定;

2. 鑒定成功后大量培養目的細胞

3. 質粒制備。

純化標準:內毒素<0.1EU/ug DNA

對于RNA干擾研究的客戶,如果客戶沒有抗體,可以利用基因過表達方法來研究蛋白水平敲減。在后基因組時代基因克隆以及基因表達研究已經成為了基礎的基因工程操作。吉瑪公司建立了整套的基因克隆與表達體系,既能對單個基因進行克隆、表達,也能進行高通量的成百上千個基因的克隆、表達,每種表達系統均有多個表達載體可供選用。



基因克隆服務


PCR產物克隆:

將客戶提供的PCR產物裝入T載體。?
客戶提供:PCR產物?
服務方提供:裝有目標基因的質粒或菌液?
質控驗收標準:電泳圖譜,測序圖譜

指定基因克隆:

客戶指定要克隆的基因(基因bank號,種屬,組織來源),我們最終提供給客戶裝有目標基因的克隆好的載體?
客戶提供:基因名稱,基因背景資料(種屬,組織表達分布)相關文獻。?
服務方提供:裝有目標基因的質粒或菌液?
質控驗收標準:PCR、質粒電泳圖譜,測序圖譜

表達載體克隆:

服務內容描述:根據客戶要求將指定片斷按照相應的方向和讀框裝入指定表達載體?
原核表達載體:客戶指定的載體。?
真核表達載體:GFP融合表達,pcDNA3.1表達或客戶指定的載體。?
客戶提供:裝有目標基因的質粒。測序圖譜。?
服務方提供:裝有目標基因的指定表達載體和菌液?
質控驗收標準:電泳圖譜,測序圖譜

慢病毒載體克隆:

服務內容描述:根據客戶要求將指定片斷按照相應的方向和讀框裝入指定表達載體?
真核表達載體:吉瑪公司指定的慢病毒載體。?
客戶提供:裝有目標基因的質粒。測序圖譜。?
服務方提供:裝有目標基因的指定表達載體和菌液?
質控驗收標準:電泳圖譜,測序圖譜?


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