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吉瑪產品

過表達慢病毒

慢病毒表達載體,即通常所說的穿梭載體,包含了包裝、轉染、穩定整合所需要的遺傳信息。而慢病毒包裝質粒可提供所有的轉錄并包裝RNA 到重組的假病毒載體所需要的所有輔助蛋白。

產品描述
實驗數據
使用方法
應用實例
訂購須知

慢病毒包裝系統一般由慢病毒表達載體和慢病毒包裝載體組成。 

慢病毒表達載體,即通常所說的穿梭載體,包含了包裝、轉染、穩定整合所需要的遺傳信息。而慢病毒包裝質粒可提供所有的轉錄并包裝RNA 到重組的假病毒載體所需要的所有輔助蛋白。為產生高滴度的病毒顆粒,需要利用表達載體和包裝質粒同時共轉染細胞,在細胞中進行病毒包裝,包裝好的假病毒顆粒分泌到細胞外的培養基中,離心取得上清液后,可以直接用于宿主細胞的感染。 

慢病毒系統可以轉染多種細胞類型如原代細胞、干細胞、非分裂細胞等,實現可重復的穩定表達。對于一些較難轉染的細胞,慢病毒系統采用病毒包裝外源基因方式進入細胞并穩定表達,是一種理想的基因表達工具。慢病毒通過順式作用元件將病毒運送入細胞核,將所要表達的基因序列重組整合到細胞的基因組中,從而實現目的序列持續穩定的高表達。 
吉瑪公司傾情推出過表達慢病毒系列產品,為廣大科研工作者提供有力的過表達手段,解決轉染效率低的難題。 


吉瑪公司過表達慢病毒交貨期限及收費標準:


產品 規格 報價(元) 生產周期(工作日)
過表達慢病毒1(≤300bp) 10^8TU/ml ¥4880 40
過表達慢病毒2(≤300bp) 10^9TU/ml ¥5880 40
過表達慢病毒3(≤3000bp) 10^8TU/ml 基因數*2+¥3880 40-60
過表達慢病毒4(≤3000bp) 10^9TU/ml 基因數*2+¥4880 40-60






吉瑪公司全基因合成真核過表達載體類型:



編號 啟動子 熒光標簽 真核抗性 原核抗性
LV4 EF-1a GFP -- Amp
LV5 EF-1a GFP Puro Amp
LV6 EF-1a -- Puro Amp
LV7 EF-1a RFP -- Amp
LV8 EF-1a RFP Puro Amp
LV8N EF-1a mCherry Puro
LV11 CMV -- Neo Amp
LV13 EF-1a luci05 Puro Amp
LV14 EF-1a luci17 -- Amp
LV17 EF-1a luci17 Puro Amp













注意事項:

 1、上述價格均不包括運輸費用。江浙滬地區1、上述價格均不包括運輸費用。江浙滬地區免收運費,其它城市或地區收取干冰寄送費用300元。 


2、本公司原則上只提供假病毒顆粒形式的慢病毒產品。如果客戶需要我們提供上游構建的干擾穿梭載體,則需要額外支付相應的穿梭載體購買費用(1000元/個),過表達慢病毒的穿梭載體不予提供。 


3、如客戶所需包裝的目的基因由客戶提供,則客戶應提供所要構建慢病毒的目的基因的序列及其它相關說明信息(例如裝載載體、質粒圖譜、酶切位點等)。客戶應對所提供的材料及信息負責,如因客戶提供的材料及信息不準確而引起的實驗延誤或經濟損失由客戶承擔。 


4、由于過表達慢病毒滴度有可能收到表達基因及其長度影響,如第一次包裝未達到滴度則重新包裝一次,如果仍未達到滴度則按實際滴度出貨,客戶至少需付貨款金額的50%。實驗周期相應延長;客戶基因中存在特殊序列或基因結構復雜(如:10bp以上的重復序列;8bp以上的同一堿基的連續結構;GC含量超過70%等)時需視具體情況另行協商收費標準。 


5、如客戶需委托本公司使用包裝好的慢病毒感染目的細胞,建立穩定表達目的基因或目的shRNA的細胞系,則相關實驗費用另外計算。

 
6、例如按照10^8TU的規格包裝滴度在10^7~10^8TU/ml,我們認為是合格的,如果低于10^7TU/ml,我們會再重新包裝一次,如果滴度依舊很低,我們會與客戶溝通協商出貨價格,最多減免1000元.但如果操作沒問題,通常不會再次反復包裝,如果不接受,可以不發貨不收款,miRNA相關病毒只保證序列、滴度達到要求,效果不同細胞不予保證。對于特殊訂單(客戶提供穿梭載體、基因較長,特殊結構,需特殊處理表達,基因對細胞正常生長有可能產生影響等),我們通常會收取50%預付款,才能安排生產,而且生產周期要有溝通,而且如果生產對照、實驗操作沒問題,實驗結果達不到預期我們預付款也是要收的。

 
7、由rnaisupport@genepharma.com聯系的訂單,訂單發送請同時抄送該郵箱,以免訂單遺漏溝通有誤。



元件 功能
RSV/5'LTR Hybrid RSV promoter-R/U5 long terminal repeat; required for viral packaging and transcription
Psi pack Packaging signal
RRE Rev response element binds gag and involved in packaging of viral transcripts
cPPT Central polypurine tract (includes DNA Flap region) involved in nuclear translocation and integration of transduced viral genome
EF1a promoter RNA polymerase II promoter for expression of target gene insert
CMV promoter Human cytomegalovirus (CMV)--constitutive promoter for transcription of reporter gene
T2A Thosea asigna virus 2A translational cleavage site containing 18 amino acid residues. Cleavage occurs via a co-translational ribosome skipping mechanism between the C-terminal Glycin and Prolin residues, leaving 17 residues attached to the end of copGFP and 1 residue to the start of the puromycin resistance marker
Puro Puromycin-resistant marker for selection of the ransfected/transduced cells
WPRE Woodchuck hepatitis virus posttranscriptional regulatory element-- enhances the stability of the viral transcripts
3' LTR Required for viral reverse transcription; self- inactivating 3' LTR with deletion in U3 region prevents formation of replication-competent viral particles after integration into genomic DNA
Amp Ampicillin resistant gene for selection of the plasmid in E. coli




備注:

 1. 對于普通線性基因(mRNA/lncRNA)
    轉染效率良好的情況下(>80%),保證mRNA水平上調有顯著性差異(與對照組相比)。

 2. 對于CircRNA
    保證序列設計符合設計原則,保證序列合成和訂單要求一致,保證滴度和體積達到共同保證要求,不保證干擾效果。非承諾質量問題,無效也需付款。

 3. 對于Mimic病毒
    保證序列正確、滴度和體積達到共同保證要求,一般工具細胞上(比如293T)qPCR能檢測到miRNA上調有顯著性差異,客戶細胞如果檢測不到過表達,可以換成前體或者初級體試一下(款到發貨)。


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