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miRNA熒光定量PCR試劑盒

Hairpin-itTM MicroRNAs Quantitation PCR的特點: 高度特異,特異性的Stem-loop RT primer與miR-specific Molecular Beacon probe雙重保證,確保反應不受其前體及其他因素干擾;序列高度同源的miRNAs也可精確區分;

產品描述
實驗數據
使用方法
應用實例
訂購須知

目前,最常用的檢測和定量MicroRNA的方法是northern雜交, 芯片(microarrays)以及核糖核酸酶保護分析(ribonuclease protection assays),這些傳統方法都需要標記探針并與純化的RNA進行雜交。由于成熟的miRNAs及其前體共享一段相同的靶序列,而目前基于雜交的各種技術又無法通過分子大小將它們區分,因此很難專一性的識別成熟miRNAs,結果導致很高的前體背景信號。?

此外,基于雜交的各種技術需要標記步驟或放射性同位素,所得數據的動態分布范圍又很有限,使得miRNAs的檢測非常困難、費時且昂貴。

Hairpin-itTM Real-Time PCR miRNAs定量檢測方法
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GenePharma microRNAs 定量PCR檢測解決方案





Hairpin-itTM miRNAs qPCR Quatitation Assay 包括兩步

Stem-loop RT 2. Real-time PCR

Stem-loop RT primer 與miroRNA 分子的3’端結合,然后用逆轉錄酶將RNA逆轉錄成cDNA;
將得到RT產物與miroRNA特異引物以及熒光標記的Molecular Beacon probes一起進行優化的real-time PCR反應。

Hairpin-itTM miRNAs qPCR Quantitation Assay原理






Hairpin-itTM miRNAs Real-time PCR Quantitation Assay?的動態范圍及靈敏度



Hairpin-itTM miRNAs Real-time PCR Quantitation Assay標準曲線


Hairpin-itTM MicroRNAs Quantitation PCR的特點

高度特異,特異性的Stem-loop RT primer與miR-specific Molecular Beacon probe雙重保證,確保反應不受其前體及其他因素干擾;序列高度同源的miRNAs也可精確區分;

超寬的定量線性范圍和高度檢測靈敏度,從幾個拷貝一直到幾萬個拷貝,定量線性范圍跨越7個數量級;

樣品消耗量少,僅需1-10ng total RNA;

適用的樣品范圍廣,total RNA、細胞裂解物以及純化的RNA都可以用于qRT-PCR 的模板,即使基因組DNA的污染也不會干擾miRNA的定量;

金牌質量的miRNA標準合成物,即可精確用來作標準曲線絕對定量之用,又可用來作相對定量的陽性對照

操作快速簡單,可實現RT與PCR反應一步完成;

重復性好,經過吉瑪公司經驗豐富的技術人員嚴格的質量檢驗。

Hairpin-itTM miRNAs qPCR Quantitation Kit
目錄號 規格 價格
E01006 50?rxns ¥600
E01007 100 rxns ¥1,100
E01008 200rxns ¥2,000
E01009 300rxns ¥2,500
E01005 500 rxns ¥3,600

產品特點

高度特異性的miRNA Hairpin primer;
只對成熟MicroRNAs進行定量,不受其前體干擾;序列高度同源的miRNAs也可精確區分;
靈敏度極高,僅需1-10ng的total RNA或同等物;
超寬的定量線性范圍,可跨越7個數量級,從幾個拷貝一直到幾百萬個拷貝;
可實現對每個細胞所含目標miRNA分子進行準確定量;
試劑盒內含合成的miRNA標準品一支。
□適用的熒光定量PCR儀器?
ABI PRISM 7000/7300/7500/7900
MJ-opticon、Opticon2及Chromo4 系列、MX3000p/4000
Bio-Rad IQ系列、Light Cycler、Rotogene3000、FTC-2000

試劑盒組成(20μl×100 rxns)

Real-time PCR Master Mix(2×)* 1ml×1支?
miRNA Hairpin-primer Set(5μM)80μl×1支?
miRNA RT primer(10μM) 15μl×1支?
Taq DNA polymerase (5U/μl)20μl×1支?
Synthetic miR-16 Standard 1支
1X RNA Dilution buffer 1ml×1支

*內含dNTP Mixture,Mg2+,SYBR Green1等.

試劑盒的保存

-20℃ 避光保存,避免反復凍融。保質期6個月.

產品特點

1、高度特異性的miRNA Hairpin primer;

2、只對成熟MicroRNAs進行定量,不受其前體干擾;序列高度同源的miRNAs也可精確區分;

3、靈敏度極高,僅需1-10ng的total RNA或同等物。

4、超寬的定量線性范圍,可跨越7個數量級,從幾個拷貝一直到幾百萬個拷貝。

5、可實現對每個細胞所含目標miRNA分子進行準確定量

6、試劑盒內含合成的miRNA標準品一支

適用的熒光定量PCR儀器
ABI PRISM 7000/7300/7500/7900 MJ-opticon、Opticon2及Chromo4 系列、MX3000p/4000 Bio-Rad IQ系列、Light Cycler、Rotogene3000、FTC-2000。
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